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硫酸粘杆菌素对雏鸡红细胞的影响 |
周 艳 Siegel(1981)在前人研究的基础上提出了“红细胞免疫系统”(Red Cell Immune S ystem , RCIS) 的新概念,随后红细胞免疫功能的研究发展迅速。现已证实,红细胞具有粘附、杀伤抗原, 清除免疫复合物, 参与机体免疫调控的作用, 而且其自身存在完整的自我调控系统, 是完整机体免疫系统中的重要组成部分。 粘杆菌素是 Kayama(1950) 发现的一株多粘芽孢杆菌产生的碱性多肽类抗生素。其作用机制与多粘菌素其它组分的作用机制相同, 即粘杆菌素带正电荷的游离氨基能和细菌胞浆膜内磷脂中带负电荷的磷酸根相结合, 使胞浆膜表面张力降低, 破坏膜的通透性,使细胞内主要成分, 特别是嘌呤、嘧啶等从细胞浆中流出, 细菌生长发生抑制或导致细菌死亡。 由于粘杆菌素具有较低的毒性及良好的抗菌活力, 我国普遍将其作为畜禽的饲料添加剂。目前, 有关粘杆菌素对免疫功能的影响报道较少。Voiculescu(2004) 研究认为, 粘杆菌素可显著抑制机体的体液和细胞免疫。胡坚等(1990) 用多项免疫学指标体外试验研究了多粘菌素 B(polymyxinB, 简称 PMB) 对小鼠免疫功能的影响表明, PMB 可抑制 B 和 T 淋巴细胞的磷脂或钙依赖的蛋白激酶(PK- C) 活性, 同时抑制 T细胞 DNA 和蛋白质合成, PMB 尚可诱导肥大细胞释放组胺。迄今为止, 粘杆菌素对红细胞免疫功能影响的研究还未见报道, 本文通过测定红细胞 C3b 受体(C3bR) 花环率和免疫复合物(IC) 花环率, 研究不同剂量的硫酸粘杆菌素对雏鸡红细胞免疫功能的影响,进而为硫酸粘杆菌素的应用提供参考依据。 1 材料与方法 1.1 试验动物分组与管理 将 120 只 1 日龄艾维茵肉鸡( 购于温江正大种禽场, 平均体重 41.5 g)随机分为 5 组: I 组( 基础日粮对照组)、 组 ( 基础日粮+20 mg/kg 硫酸粘杆菌素试验 II组)、 组( 基础日粮+40 mg/kg硫酸粘杆菌素试验组)、 IIIIV组(基础日粮+60 mg/kg 硫酸粘杆菌素试验组) 和 V组( 基础日粮+80 mg/kg 硫酸粘杆菌素试验组)。饲养于禽舍内, 以常规管理方式分组育雏, 试验期 42 d。试验雏鸡 7 日龄首免鸡新城疫、鸡传染性支气管炎二联活疫苗, 14 日龄用鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗, 采用滴鼻或点眼的方法进行免疫。 1.2 药品与试剂 酵母多糖冻干试剂(由上海长海医院免疫室提供)、硫酸粘杆菌素( 由四川民生药业提供)、鸡法氏囊病中等毒力活疫苗[豫生药字(2004)152226, 乾元浩生物股份有限公司郑州生物药厂提供]、鸡新城疫(Lasota株)、鸡传染性支气管炎二联活疫苗[豫生药字(2004)152239, 乾元浩生物股份有限公司郑州生物药厂]。 1.3 试验设计 每组分别于 7、14 、21 、28 、35 、 42日龄随机选取 5只肉鸡, 抽取颈静脉或翅下静脉血, 血液中加 2 g/l 肝素钠抗凝, 2 000 r/min 离心 5 min, 分别吸出 0.1 ml 血浆备用。分别加适量禽类生理盐水稀释血浆, 离心 2 次(2 000 r/min, 每次 5 min), 充分摇匀, 调整红细胞浓度, 配成每毫升 1.25×107 个红细胞悬液备用。 将酵母菌( 冰冻试剂) 配制成每毫升含 1×108 个酵母菌的悬液备用。 1.4 红细胞 C3b 受体(C3bR) 和免疫复合物(IC) 花环率测定 测定方法均按郭峰等(1990)介绍的方法进行。
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