从图1可见，硫酸粘菌素与苟三酮水溶液显色后在选定磷酸盐缓冲液(P H7.0)中于565nm处有最大吸收，并且没有干扰。因此检测波长选择在565nm波长。
2溶剂选择硫酸粘菌素是多肤类物质，在偏酸溶液中稳定，在偏碱溶液中不稳定，在pH7.5以上溶液中有沉淀析出。经pHS~pHS.0等8种不同pH磷酸盐缓冲液对测定吸光度的影响，见表1。
结果表明，不同pH磷酸盐缓冲液对吸光度有很大影响，当pH7.o时吸光度的灵敏度最高。
3不同浓度茚三酮水容液时测定结果的影响分别以布三酮水溶液0.1%~1%等6种浓度进行测试，结果见图2。
从图2看出，随着布三酮溶液浓度的加大，吸光度随之增加，因此试验表明1%布三酮水溶液为最佳浓度。
4硫酸拈菌素与蹄三酮缩合反应在沸水浴中加热时间对浏定吸光度的影响经试验，在沸水浴中加热10、20、30、40分钟等四种时间，在565mm波长处测吸光度，结果见表2。
表2说明硫酸粘菌素与荀三酮水溶液显色反应，在沸水浴中加热30分钟最合适。
5硫酸粘菌素浓度与疖三酮反应的线性关系在选定条件下，制备成每毫升含625、750、875、1000、1125及1250u等6种浓度与相同量的布三酮反应，在565nm波长处测吸光度，观察浓度与反应曲线，结果见图3。其直线相关系数r=0.9950，呈线性关系，即在特定条件下浓度与反应符合比尔定律，是建立溶出量测定的理论基础。
6呈色反应后溶液稳定性考察反应后呈色溶液在室温放置1、2、4小时后在565nm波长处测定吸光度，结果见表3。
从表3可见反应后的溶液较稳定，放置4小时吸光度变化不大。
7方法的回收试验与重现性考察取供试品续滤液，与一片平均片重续滤液在相同条件下处理，在565nm波长处测定吸光度。回收试验两批样品分别为99。45%和99。56%(见图4)。
精密量取供试品续滤液10份，每份8ml，在同一条件下操作，于565nm波长处测定吸光度，见表4。
从表4的结果说明，通过十次侧试，变异系数CV值为2.87%。
8溶出条件的摸索
5.1转速:考察了loorpm/分和12Orpm/分两种条件。从试验结果表明:两批供试品，当转速loorpm/分时测试结果分别为73%~7了%;当转速120rpm/分时测试结果分别为99.4%~101.4%。故采用120pm/分时溶出效果较好。
8.2溶出速率:将两批洪试品根据已测
试的最佳条件，磷酸盐缓冲液(pH7.0)500ml为介质液，每个容器中置供试品2片，转速12OrPm/分经10、20、30、45分钟各取供试液(并立即补足同体积的介质液于容器内)过滤，取续滤液与供试品平均片重续滤液，在相同条件下操作，测得吸光度，计算不同时间的平均累积溶出百分率见表5。
以累积溶出百分率为纵座标，时间为横座标，绘制溶出曲线(见图5)。
图5可看出两批供试品的溶出速率皆是随着时间延长，准出量不断增加，10分钟分别溶出量为标示量的57%和75。5%;20分钟为73.8%和81.5%，30分钟为87.2%和88.9对，45分钟几乎全部溶出，为其标示量的90 .7%和96.了%，故取样时间定为45分钟为宜。
9供试品溶出度测定结果见表6。
从表6可见，通过上述条测试该两批样品，平均溶出度皆为90%以上。
参考文献
l解庆缤等.抗生素1988，1，38
2中国药典90版二部(附录60页)
